ھۈجەيرە مەدەنىيەت مۇھىتى ھۈجەيرە ئىشلەپچىقىرىشىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ

ھۈجەيرە مەدەنىيىتىنىڭ ئاساسلىق ئەۋزەللىكىنىڭ بىرى ھۈجەيرە كۆپىيىشنىڭ فىزىكىلىق خىمىيىسىنى كونترول قىلىش ئىقتىدارى (يەنى تېمپېراتۇرا ، pH ، ئوسموتىك بېسىم ، O2 ۋە CO2 جىددىيلىكى) ۋە فىزىئولوگىيىلىك مۇھىت (يەنى ھورمون ۋە ئوزۇقلۇقنىڭ قويۇقلۇقى).تېمپېراتۇرادىن باشقا ، مەدەنىيەت مۇھىتى ئۆسۈش ۋاستىسى تەرىپىدىن كونترول قىلىنىدۇ.

گەرچە مەدەنىيەتنىڭ فىزىئولوگىيىلىك مۇھىتى ئۇنىڭ فىزىكىلىق ۋە خىمىيىلىك مۇھىتىدەك ئېنىق بولمىسىمۇ ، قان زەردابى تەركىبلىرىنى تېخىمۇ ياخشى چۈشىنىش ، كۆپىيىشكە ئېھتىياجلىق ئۆسۈش ئامىللىرىنى پەرقلەندۈرۈش ۋە مەدەنىيەتتىكى ھۈجەيرىلەرنىڭ مىكرو مۇھىتىنى تېخىمۇ ياخشى چۈشىنىش..

1. مەدەنىيەت مۇھىتى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ
شۇنىڭغا دىققەت قىلىڭكى ، ھەر بىر ھۈجەيرە تىپى ئۈچۈن ھۈجەيرە مەدەنىيەت شارائىتى ئوخشىمايدۇ.
مەلۇم بىر ھۈجەيرە تىپىغا ئېھتىياجلىق بولغان مەدەنىيەت شارائىتىدىن چەتنەپ كېتىشنىڭ ئاقىۋىتى بىنورمال فېنوتىپلارنىڭ ئىپادىلىنىشىدىن ھۈجەيرە مەدەنىيىتىنىڭ پۈتۈنلەي مەغلۇبىيىتىگىچە بولىدۇ.شۇڭلاشقا ، سىز قىزىقىدىغان ھۈجەيرە لىنىيىسى بىلەن تونۇشۇپ ، تەجرىبىڭىزدە ئىشلەتكەن ھەر بىر مەھسۇلاتقا بېرىلگەن كۆرسەتمىگە قاتتىق ئەمەل قىلىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز.

2. ھۈجەيرىلىرىڭىز ئۈچۈن ئەلالاشتۇرۇلغان ھۈجەيرە مەدەنىيەت مۇھىتى يارىتىشنىڭ ئالدىنى ئېلىش تەدبىرلىرى:
مەدەنىيەت تاراتقۇلىرى ۋە قان زەردابى (تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرغا ئېرىشىش ئۈچۈن تۆۋەنگە قاراڭ)
pH ۋە CO2 سەۋىيىسى (تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرلارنى تۆۋەندىكى ئورۇنغا قاراڭ)
سۇلياۋ يېتىشتۈرۈڭ (تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرغا ئېرىشىش ئۈچۈن تۆۋەنگە قاراڭ)
تېمپېراتۇرا (تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرغا ئېرىشىش ئۈچۈن تۆۋەنگە قاراڭ)

2.1 مەدەنىيەت تاراتقۇلىرى ۋە قان زەردابى
مەدەنىيەت ۋاستىسى مەدەنىيەت مۇھىتىنىڭ ئەڭ مۇھىم قىسمى ، چۈنكى ئۇ ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشىگە ئېھتىياجلىق ئوزۇقلۇق ، ئۆسۈش ئامىلى ۋە ھورمون بىلەن تەمىنلەيدۇ ھەمدە مەدەنىيەتنىڭ pH ۋە ئوسموتىك بېسىمىنى تەڭشەيدۇ.

گەرچە دەسلەپكى ھۈجەيرە مەدەنىيەت تەجرىبىسى توقۇلما جەۋھىرى ۋە بەدەن سۇيۇقلۇقىدىن ئېرىشكەن تەبىئىي مېدىيادىن پايدىلىنىپ ئېلىپ بېرىلغان بولسىمۇ ، قېلىپلاشتۇرۇشنىڭ ئېھتىياجى ، مېدىيا سۈپىتى ۋە ئېھتىياجنىڭ ئېشىشى ئېنىق تاراتقۇلارنىڭ تەرەققىي قىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.ئۈچ خىل ئاساسلىق مېدىيا ئاساسى مېدىيا ، قان زەردابى مېدىياسى ۋە قان زەردابىسىز مېدىيا بولۇپ ، ئۇلارنىڭ قان زەردابىنى تولۇقلاشقا بولغان تەلىپى ئوخشىمايدۇ.

2.1.1 Basic medium
Gibco ھۈجەيرە مەدەنىيىتى
كۆپىنچە ھۈجەيرە لىنىيىسى تەركىبىدە ئامىنو كىسلاتاسى ، ۋىتامىن ، ئانئورگانىك تۇز ۋە كاربون مەنبەسى (گلۇكوزا قاتارلىق) بار بولغان ئاساسلىق مېدىيالاردا ياخشى ئۆسىدۇ ، ئەمما بۇ ئاساسلىق مېدىيا فورمۇلاسىنى چوقۇم قان زەردابى بىلەن تولۇقلاش كېرەك.

2.1.2 تۆۋەنلىتىلگەن قان زەردابى
Gibco تۆۋەن قان زەردابى بىلەن بوتۇلكا
ھۈجەيرە مەدەنىيەت تەجرىبىسىدىكى قان زەردابىنىڭ پايدىسىز تەسىرىنى ئازايتىشنىڭ يەنە بىر ئىستراتېگىيىسى قان زەردابىنى ئازايتىدىغان مېدىيا ئىشلىتىش.كېمەيتىلگەن قان زەردابىسى ئوزۇقلۇق ۋە ھايۋاناتتىن ھاسىل بولغان ئامىللار مول بولغان ئاساسلىق ئوتتۇرا فورمۇلا بولۇپ ، ئېھتىياجلىق قان زەردابىنى ئازايتالايدۇ.

2.1.3 قان زەردابىسىز ۋاسىتە
Gibco قان زەردابىسىز ۋاسىتە
قان زەردابىسىز ۋاسىتە (SFM) قان زەردابىنى مۇۋاپىق ئوزۇقلۇق ۋە ھورمون فورمۇلاسىغا ئالماشتۇرۇش ئارقىلىق ھايۋانلارنىڭ قان زەردابىنى ئىشلىتىشنى ئايلاندۇرىدۇ.نۇرغۇنلىغان دەسلەپكى مەدەنىيەت ۋە ھۈجەيرە لىنىيىسىدە قان زەردابىسىز ئوتتۇرا تۈزۈلۈش بار ، بۇلار جۇڭگو خامستېر تۇخۇمدان (CHO) قايتا ھاسىل بولىدىغان ئاقسىل ئىشلەپچىقىرىش لىنىيىسى ، ھەرخىل ئارىلاشما ھۈجەيرە لىنىيىسى ، ھاشارات لىنىيىسى Sf9 ۋە Sf21 (Spodoptera frugiperda) ، شۇنداقلا ۋىرۇس ئىشلەپچىقىرىشتىكى ساھىبجامال. (مەسىلەن ، 293 ، VERO ، MDCK ، MDBK) قاتارلىقلار.تۆۋەندىكى جەدۋەلدە قان زەردابىسىز مېدىيانىڭ ئەۋزەللىكى ۋە كەمچىلىكى كۆرسىتىلدى.

ئەۋزەللىكى
ئېنىقلىق دەرىجىسىنى ئاشۇرۇش
تېخىمۇ تۇراقلىق ئىقتىدار
تازىلاش ۋە تۆۋەن ئېقىننى بىر تەرەپ قىلىش ئاسان
ھۈجەيرە ئىقتىدارىنى توغرا باھالايدۇ
ئىشلەپچىقىرىش ئۈنۈمىنى ئاشۇرۇش
فىزىئولوگىيىلىك ئىنكاسلارنى تېخىمۇ ياخشى كونترول قىلىش
ھۈجەيرە مېدىياسىنى تەكشۈرۈش كۈچەيتىلدى
كەمچىلىكى
ھۈجەيرە تىپىدىكى ئالاھىدە ئوتتۇرا فورمۇلا تەلىپى
تېخىمۇ يۇقىرى رېئاكتىپ ساپلىققا موھتاج
ئېشىشنىڭ ئاستىلىشى

2.2.1 pH سەۋىيىسى
كۆپىنچە نورمال سۈت ئەمگۈچى ھۈجەيرىلەرنىڭ سىزىقلىرى pH 7.4 دە ياخشى ئۆسىدۇ ، ئوخشىمىغان ھۈجەيرە سىزىقلىرىنىڭ پەرقى كىچىك.قانداقلا بولمىسۇن ، بىر قىسىم ئۆزگەرتىلگەن ھۈجەيرە سىزىقلىرىنىڭ ئازراق كىسلاتالىق مۇھىتتا (pH 7.0 - 7.4) ياخشى ئۆسىدىغانلىقى كۆرسىتىلدى ، بەزى نورمال تالا ھۈجەيرىلىرى ئازراق ئىشقارلىق مۇھىتنى ياخشى كۆرىدۇ (pH 7.4 - 7.7).Sf9 ۋە Sf21 قاتارلىق ھاشارات ھۈجەيرىلىرى pH 6.2 دە ئەڭ ياخشى ئۆسىدۇ.

2.2.2 CO2 سەۋىيىسى
ئۆسۈش ۋاستىسى مەدەنىيەتنىڭ pH نى كونترول قىلىدۇ ۋە مەدەنىيەتتىكى ھۈجەيرىلەرنى بۇففېر قىلىپ ، pH نىڭ ئۆزگىرىشىگە قارشى تۇرىدۇ.ئادەتتە ، بۇففېرلىق ئورگانىك (مەسىلەن ، HEPES) ياكى CO2- ئىككى كاربوناتنى ئاساس قىلغان بۇففېرنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.ئوتتۇراھالنىڭ pH ئېرىتىلگەن كاربون تۆت ئوكسىد (CO2) ۋە ئىككى كاربونات (HCO3-) نىڭ نازۇك تەڭپۇڭلۇقىغا باغلىق بولغاچقا ، ئاتموسفېرا CO2 نىڭ ئۆزگىرىشى ئوتتۇراھالنىڭ pH نى ئۆزگەرتىدۇ.شۇڭلاشقا ، CO2- ئىككى كاربوناتنى ئاساس قىلغان بۇففېر بىلەن ئوتتۇراھال ئۇففېر ئىشلەتكەندە ، تاشقى مەنبەلىك CO2 نى ئىشلىتىش كېرەك ، بولۇپمۇ ئوچۇق مەدەنىيەت تاماقلىرىدىكى ھۈجەيرىلەرنى يېتىشتۈرگەندە ياكى يۇقىرى قويۇقلۇقتا ئۆزگەرتىلگەن ھۈجەيرە لىنىيىسىنى يېتىشتۈرگەندە.گەرچە كۆپىنچە تەتقىقاتچىلار ئادەتتە% 5-7% CO2 نى ھاۋادا ئىشلىتىدۇ ، ئەمما كۆپىنچە ھۈجەيرە مەدەنىيەت تەجرىبىسى ئادەتتە% 4-10% CO2 نى ئىشلىتىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، ھەر بىر ۋاسىتە تەۋسىيە قىلىنغان CO2 جىددىيلىكى ۋە ئىككى كاربونات قويۇقلۇقى بولۇپ ، توغرا pH ۋە ئوسموتىك بېسىمغا ئېرىشىدۇ.تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرغا ئېرىشىش ئۈچۈن ، ئوتتۇراھال ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ كۆرسەتمىسىنى كۆرۈڭ.

2.3 سۇلياۋ يېتىشتۈرۈش
ھۈجەيرە مەدەنىيەت سۇلياۋلىرى ھەر خىل ھۈجەيرە مەدەنىيەت قوللىنىشچان پروگراممىلىرىغا ماس كېلىدىغان ھەر خىل شەكىل ، چوڭ-كىچىكلىك ۋە يۈزلەردە بار.تۆۋەندىكى ھۈجەيرە مەدەنىيىتى سۇلياۋ يۈزى قوللانمىسى ۋە ھۈجەيرە مەدەنىيەت قاچىسى قوللانمىسىنى ئىشلىتىپ ، ھۈجەيرە مەدەنىيىتىڭىزگە ماس كېلىدىغان سۇلياۋنى تاللىشىڭىزغا ياردەم بېرىدۇ.
بارلىق تېرمو ئىلمىي Nunc ھۈجەيرە مەدەنىيەت سۇلياۋلىرىنى كۆرۈڭ (ئېلان ئۇلىنىشى)

2.4 Temperature
ھۈجەيرە مەدەنىيىتىنىڭ ئەڭ ياخشى تېمپېراتۇرىسى كۆپىنچە ھۈجەيرىلەر ئايرىۋېتىلگەن ساھىبجامالنىڭ بەدەن تېمپېراتۇرىسىغا ، ھەمدە تېمپېراتۇرىنىڭ ئاناتومىيىلىك ئۆزگىرىشىگە ئازراق تەسىر كۆرسىتىدۇ (مەسىلەن ، تېرە تېمپېراتۇرىسى سۆڭەك مۇسكۇلىنىڭكىدىن تۆۋەن بولۇشى مۇمكىن) ).ھۈجەيرە مەدەنىيىتىگە نىسبەتەن ، ئىسسىق ئۆتۈپ قېلىش بەك ئىسسىق.شۇڭلاشقا ، ئىنكۇباتوردىكى تېمپېراتۇرا ئادەتتە ئەڭ ياخشى تېمپېراتۇرادىن سەل تۆۋەن بولىدۇ.

2.4.1 ھەر خىل ھۈجەيرە سىزىقلىرىنىڭ ئەڭ ياخشى تېمپېراتۇرىسى
كۆپىنچە ئىنسانلار ۋە سۈت ئەمگۈچىلەرنىڭ ھۈجەيرىلىرى ئەڭ ياخشى ئۆسۈپ يېتىلىش ئۈچۈن ° C 36 تىن ° C 37 قا ساقلىنىدۇ.
ھاشارات ھۈجەيرىلىرى ئەڭ ياخشى ئۆسۈش ئۈچۈن 27 سېلسىيە گرادۇستا يېتىشتۈرۈلىدۇ.ئۇلار تۆۋەن تېمپېراتۇرا ۋە 27 سېلسىيە گرادۇستىن 30 سېلسىيە گرادۇسقىچە ئاستا ئۆسىدۇ.30 سېلسىيە گرادۇستىن يۇقىرى ، ھاشارات ھۈجەيرىلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچى تۆۋەنلەيدۇ ، ھەتتا 27 سېلسىيە گرادۇسقا قايتقان تەقدىردىمۇ ھۈجەيرىلەر ئەسلىگە كەلمەيدۇ.
ئەڭ چوڭ ئۆسۈش ئۈچۈن قۇش ھۈجەيرىسىنىڭ لىنىيىسى 38.5 ° C قا ئېھتىياجلىق.گەرچە بۇ ھۈجەيرىلەرنى ° C 37 قا ساقلىغىلى بولسىمۇ ، ئەمما ئۇلار ئاستا-ئاستا ئۆسىدۇ.
سوغۇق قانلىق ھايۋانلاردىن ھاسىل بولغان ھۈجەيرە سىزىقلىرى (مەسىلەن ، سۇ مەھسۇلاتلىرى ، سوغۇق سۇ بېلىقلىرى) كەڭ تېمپېراتۇرا ° C15 تىن ° C 26 قىچە بەرداشلىق بېرەلەيدۇ.